Functional Genomics for the Identification of Regulatory Factors Involved in the Biosynthesis of Secondary Metabolites by the Filamentous Fungus Trichoderma reesei

Summary: Os fungos filamentosos despertam grande interesse biotecnológico por produzirem metabólitos secundários (SMs) com atividades antibióticas, antitumorais e citotóxicas, essenciais à saúde humana. A síntese de SMs é controlada por uma complexa rede regulatória que envolve fatores de transcrição e vias de sinalização intracelular. O objetivo deste trabalho é entender o envolvimento de diferentes vias de sinalização na regulação da produção de SMs de interesse biotecnológico no fungo Trichoderma reesei, bem como avaliar o potencial neuroprotetor e biológico dessas frações em sistemas celulares e eixos biomédicos complexos. Para isso, linhagens mutantes cultivadas em diferentes fontes de carbono terão seus SMs identificados por LC-MS/MS, além de análises de expressão gênica para identificação de clusters envolvidos na biossíntese. Para a viabilização e execução rigorosa de todos os experimentos propostos nesta investigação, faz-se estritamente necessária a utilização de uma Cabine de Segurança Biológica Classe II tipo A2. Este equipamento de contenção biológica e barreira física filtrada por HEPA é a infraestrutura mandatória e transversal para garantir as condições estéreis e controladas em cada fase do desenho experimental. A cabine de segurança biológica será empregada de forma contínua e obrigatória na manipulação estéril e segura de microrganismos, no preparo asséptico de inóculos biológicos e amostras, na extração de material genético purificado (DNA e RNA de alta integridade para qRT-PCR) e nos protocolos de isolamento e extração de peptídeos, metabólitos secundários fúngicos e de plantas, e moléculas bioativas puras livres de contaminações exógenas. Ademais, ressalta-se que o equipamento atende integralmente a todas as exigências normativas da Comissão de Biossegurança da UFES, garantindo a confiabilidade analítica e a proteção ocupacional necessárias para o avanço das pesquisas no PPGBiq.

Starting date: 07/12/2021
Deadline (months): 240

Participants:

Role	Name
Coordinator *	RENATO GRACIANO DE PAULA
Student Master *	THIAGO DE ANDRADE SIMON
Vice coordinator *	JULIANA BARBOSA COITINHO GONCALVES